科研服務 時間：2020-07-22 17:26:00 瀏覽：30603次
GST-Pulldown實驗的基本原理是將bait protein-GST融合蛋白親和固化在谷胱甘肽親和樹脂上，作為與目的蛋白親和的支撐物，目的蛋白溶液（或cell lysate）過柱，可從中捕獲與之相互作用的Prey Protein(目的蛋白)，洗脫結合物后通過SDS-PAGE電泳分析,從而證實兩種蛋白間的相互作用或篩選相應的目的蛋白。bait protein和Prey Protein均可通過細胞裂解物、純化蛋白、表達系統以及體外轉錄翻譯系統等方法獲得。此方法簡單易行,操作方便，但需要制備足夠量的可溶性重組蛋白，且只能檢測相對強烈的相互作用。常用作酵母雙雜交文庫篩選后的驗證手段，也可結合SDS-PAGE和MS技術，篩選與Bait Protein有互作用的蛋白質。
GST-pulldown 實驗流程
客戶提供
實驗目的：驗證Protein A與Protein B是否結合
目的蛋白信息（Protein A、Protein B）
GST-taged Protein（可選）
需檢測的樣品（已純化的Protein B溶液，Cell lysate等）
適用于Western Blot的一抗（Protein A及ProteinB）及其說明書
實驗目的：篩選X細胞中與ProteinA結合的蛋白
目的蛋白信息： ProteinA
GST-taged Protein（可選）
需檢測的樣品（已純化的Protein B溶液，Cell lysate等）
結果交付：
1、原始數據、結果圖片
2、標準實驗報告
威斯騰實驗服務流程
威斯騰生物服務項目
| 分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯免疫吸附法）技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
| 染色質免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝純化 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性支氣管炎模型 |
| 逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
| 細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
| 生長因子芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
| 信號通路磷酸化水平檢測芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
| 生長因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
| 炎癥因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
| 血管生成因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
| 凋亡因子芯片 | 基因編輯動物 | |
| 趨化因子芯片 | 電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 膜片鉗實驗 | |
| 細胞生物學 | 高通量測序 | 代謝組學 |
| 細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
| Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
| 細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞成管實驗 | ||
| 病理學檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 | |
| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | |
| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍等） |
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|
| 行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
| 水迷宮實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 神經系統藥物藥效學評價 |
| 曠場實驗 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
| 重復性刻板行為檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
| 動物跑臺檢測 | 分子藥理研究平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
| 強迫游泳 | 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
| 常規藥物體外篩選 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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