国产18禁黄网站免费观看_成人免费无尽视频_中韩欧a无线码_中文字幕在线精品_淫片特黄特黄特黄_久久宅男_国产99999_手机在线观看免费av_在线观看成人精品_野花社区观看在线_无限看片在线版免费视频大全_国产91富婆养生按摩会所_久草福利在线观看_ccyy.moe的切换路线_中国一级毛片在线观看_538精品在线观看_成人免费无码大片A毛片软件_草裙社区精品视频三区_欧美岛国激情_欧美性猛交免费看

技術(shù)原理：

CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）最新出現(xiàn)的一種由RNA指導(dǎo)Cas核酸酶對(duì)靶向基因進(jìn)行特定DNA修飾的技術(shù)。CRISPR是細(xì)菌和古細(xì)菌為應(yīng)對(duì)病毒和質(zhì)粒不斷攻擊而演化來(lái)的獲得性免疫防御機(jī)制。在這一系統(tǒng)中，crRNA（CRISPR-derived RNA）通過堿基配對(duì)與tracrRNA（trans-activating RNA）結(jié)合形成雙鏈RNA，此tracrRNA/crRNA二元復(fù)合體指導(dǎo)Cas9蛋白在crRNA引導(dǎo)序列靶定位點(diǎn)剪切雙鏈DNA達(dá)到對(duì)基因組DNA進(jìn)行修飾的目的。CRISPR/Cas9系統(tǒng)能夠?qū)π∈蠛痛笫蠡蚪M特定基因位點(diǎn)進(jìn)行精確編輯， 目前已經(jīng)成功應(yīng)用于大、小鼠基因KO/KI的模型制備。

技術(shù)特點(diǎn)：

（1）無(wú)物種限制

（2）靶向精確性更高

（3）可實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因多個(gè)位點(diǎn)同時(shí)敲除

（4）基因調(diào)控方式多種多樣

（5）修飾效率高，實(shí)驗(yàn)周期短

條件性基因敲除通常利用“Cre-LoxP”系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)。首先把兩個(gè)LoxP位點(diǎn)插入到目的基因的一個(gè)或幾個(gè)重要外顯子的兩端，以制備出有兩個(gè)Loxp位點(diǎn)的floxed小鼠。floxed小鼠在與表達(dá)Cre重組酶小鼠雜交之前，該基因正常表達(dá)；當(dāng)floxed小鼠與組織特異性表達(dá)Cre酶的小鼠進(jìn)行雜交后，可實(shí)現(xiàn)在特定的組織或細(xì)胞中敲除該基因，而在其它組織或細(xì)胞中該基因表達(dá)正常。

建系原則與流程：

1、與野生型小鼠雜交：陽(yáng)性CRISPR-Pro小鼠（+/flox）與野生型小鼠（+/+）雜交，獲得F1代雜合子小鼠（+/flox）；

2、挑選一對(duì)F1代雜合子小鼠（+/flox）進(jìn)行自交，獲得F2代純合子小鼠（flox/flox）。

報(bào)告基因（Reporter/Tag）小鼠模型

指在目的基因的位置引入報(bào)告基因（如EGFP、mRFP、mCherry、mYFP或LacZ等）或標(biāo)記基因的小鼠模型，通過報(bào)告基因的表達(dá)監(jiān)控目的基因啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄活性、監(jiān)控目的蛋白的表達(dá)定位及細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)。

人源化（Humanized）小鼠模型

指帶有功能性的人類基因、細(xì)胞、組織或器官的小鼠模型，通常被用做人類疾病體內(nèi)研究的活體替代模型。本服務(wù)內(nèi)容涉及到的是指帶有功能性人類基因的小鼠模型。

Rosa26位點(diǎn)基因敲入小鼠模型

指在Rosa26位點(diǎn)引入某種基因的轉(zhuǎn)基因小鼠模型。傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因小鼠一般通過利用質(zhì)粒進(jìn)行受精卵原核注射的方式來(lái)制備，通常會(huì)得到多個(gè)品系（Founders)。不同品系由于質(zhì)粒在染色體上的整合位點(diǎn)不同、拷貝數(shù)不同，不同品系之間不容易得到一致的結(jié)果。而且由于轉(zhuǎn)基因小鼠傳代后，轉(zhuǎn)基因的拷貝數(shù)稀釋以及基因沉默等原因，同一品系的表型在傳代過程中也很容易丟失，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能重復(fù)。現(xiàn)在大部分實(shí)驗(yàn)室都是通過定點(diǎn)轉(zhuǎn)基因的方式來(lái)制備轉(zhuǎn)基因小鼠。其中用的最多的位點(diǎn)是Rosa26位點(diǎn)。

條件性點(diǎn)突變小鼠模型-誘導(dǎo)性（Inducible）

指在誘導(dǎo)劑的作用下，點(diǎn)突變能在特定的時(shí)間點(diǎn)被引入特定細(xì)胞或組織中目的基因位置的動(dòng)物模型。誘導(dǎo)前表達(dá)野生型蛋白；誘導(dǎo)后，突變的蛋白在全身所有特定的細(xì)胞或組織中表達(dá)。

威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程

威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目

【本平臺(tái)合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動(dòng)物、SPF動(dòng)物保種、病理學(xué)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)、影像學(xué)檢測(cè)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測(cè)序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評(píng)價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
【全國(guó)免費(fèi)熱線】400-675-6758
【電話】 023-65316016,023-65316556
【郵箱】 china-western@163.com
【官網(wǎng)網(wǎng)址】www.hbasx.com
【地址】 重慶市高新區(qū)二郎創(chuàng)業(yè)大道高科創(chuàng)業(yè)園D棟2樓