科研服務 時間：2020-07-17 17:06:00 瀏覽：29221次
人類疾病的動物模型在醫學科學研究方面占有十分重要的地位。威斯騰生物動物中心經過十余年的發展，累積了豐富的動物培養和模型構建經驗，在動物模型構建方法上摸索出獨有經驗，常規動物模型構建平均成功率98%以上，重難點模型（開胸/開顱術等）構建平均成功率75%以上,形成了高效高質量的動物模型構建方法庫，可成功構建上百種疾病動物模型。
SD大鼠心肌梗死模型
通過結扎左冠狀動脈前降支（LAD）制作心肌梗死模型。實驗鼠稱重，7%水合氯醛按5ml/kg 行腹腔注射麻醉，頸部、胸部備皮，用酒精棉球對手術區消毒，頸部正中切口，鈍性分離兩側肌肉暴露氣管，于大鼠口腔行氣管插管后接小動物呼吸機，保持呼吸穩定后在左胸前第3、4肋間作橫切口，依次鈍性分離各層肌肉，小心剪開肋間肌，暴露心臟后撕破心包膜，擠出心臟在左心耳的右緣下1-2mm處、肺動脈圓錐左緣處用圓針穿過左冠狀動脈前降支下方的心肌表層，用5-0線結扎，結扎成功后，可觀察到結扎血管以下心室壁稍變白，立即將心臟放入胸腔并縫合胸腔，用注射器將胸腔內空氣抽出，確定無開放性氣胸后依次縫合胸壁各層組織。大鼠術后恢復自主呼吸后拔除氣管插管。
大鼠脊髓損傷實驗動物模型
實驗鼠自購回后動物房12h-12h晝夜交替，保持大鼠自由飲水、進食，溫度23-25℃，適應性喂養一周后進入實驗。
Wistar大鼠稱重，采用7%水合氯醛5ml/kg腹腔注射麻醉后，俯臥位固定于手術臺上，以T10棘突為中心，備皮，酒精消毒后取背部正中切口，長約2cm，依次切開皮膚、皮下組織，切開并分離脊柱兩側肌肉及筋膜，顯露T9~T11椎體棘突及椎板。然后用止血鉗小心咬除T10及附近棘突與椎板，暴露并保持硬脊膜的完整。用2.2×5mm弧形面與脊髓接觸，壓迫為質量50g的重物，壓迫時間5min，大鼠雙后肢癱瘓證明造模成功。逐層縫合肌肉及皮膚。
BBB（大鼠脊髓損傷）評分標準：
0分：無可見后肢運動
1分：一或兩個關節輕微運動，通常為髖和/或膝關節
2分：一個關節廣泛活動或一個關節廣泛活動且有另一關節輕微活動
3分：兩個關節廣泛活動
4分：后肢全部三個關節可輕微活動
5分：兩個關節輕微活動，第三個關節可廣泛活動
6分：兩個關節廣泛活動，第三個關節可輕微活動
7分：后肢全部三個關節可廣泛活動
8分：非承重情況下可以爪掌面著地
9分：間或爪掌面承重支撐或爪背面承重移動，無爪掌面支撐移動
10分：偶見爪掌面承重移動；無前后肢協調動作
11分：可較多的見到掌面承重移動，但無前后肢協調動作
12分：可較多的見到掌面承重移動，偶見前后肢協調動作
13分：常見掌面承重移動，可常見前后肢協調動作
14分：有持續性掌面承重移動和前后肢協調動作；或出現常見的掌面移動，持續型前后肢協調動作，偶有爪背側移動
15分：持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作，前肢前進過程中無或歐有抓地；初接觸時主動爪位置與身體平行
16分：步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作，前肢前進過程中常見爪抓地；初接觸時主動爪位置與身體平行，負重轉移后旋轉。
17分：步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作，前肢前進過程中常見爪抓地；初接觸時和負重轉移后主動爪位置均與身體平行。
18分：步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作，前肢前進過程中可持續性爪抓地；初接觸時主動爪位置均與身體平行，負重轉移后旋轉。
19分：步態中可見持續性掌面移動和持續性前后肢協調動作，前肢前進過程中可持續性爪抓地；初接觸時和負重轉移后主動爪位置均與身體平行。尾巴有時或總是下垂。
20分：持續性掌面移動，持續性協調步態，足趾持續抓地，初接觸時和負重轉移后主動爪位置均與身體平行，軀干不穩定，尾巴持續翹起。
21分：持續性掌面移動，持續性協調步態，足趾持續抓地，活動過程中主動爪位置始終與身體平行，軀干持續穩定，尾巴持續翹起。
威斯騰實驗服務流程
威斯騰生物服務項目
| 分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
| 實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
| ELISA（酶聯免疫吸附法）技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
| 生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
| 雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
| 染色質免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
| 高血壓模型 | ||
| 病毒包裝 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
| 過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
| 過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
| 逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
| 腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
| 細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
| BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
| 生長因子芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
| 炎癥因子芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
| 血管生成因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
| 凋亡因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
| 趨化因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
| HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
| 電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 | |
| 膜片鉗實驗 | ||
| 細胞生物學檢測 | 高通量測序 | 代謝組學 |
| 細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
| MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
| 細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
| 細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
| 細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
| Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
| 流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
| CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
| 臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
| 藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
| 細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
| 細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 細胞成管實驗 | ||
| 病理檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片（限人和小鼠來源樣本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
| 免疫熒光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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| 原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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| 熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 |
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| 特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍等） |
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| 行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
| 曠場實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
| 重復性刻板行為檢測 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
| 動物跑臺檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
| 強迫游泳 | 分子藥理研究平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
| 生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 | |
| 常規藥物體外篩選 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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