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穩(wěn)定細(xì)胞系在重組蛋白制備、抗體制備、藥物篩選、基因功能研究及其它方面起著重要作用。穩(wěn)定細(xì)胞系能持續(xù)生長，并持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)外來基因。根據(jù)研究或應(yīng)用方向，可通過改變插入的拷貝數(shù)及啟動子活性，調(diào)控外源基因在靶細(xì)胞的表達(dá)水平，使其升高、降低、或與靶細(xì)胞內(nèi)源基因表達(dá)量相等。外源基因的插入方式可分為隨機(jī)插入，或插入定點(diǎn)位置。

威斯騰生物現(xiàn)為廣大研究者提供穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù)，使用最先進(jìn)技術(shù)水平，為您提供高質(zhì)量的穩(wěn)定細(xì)胞系。構(gòu)建服務(wù)可使用復(fù)能基因提供的 CHO、HEK293、Hela、NIH3T3等工具細(xì)胞，也可使用客戶指定的特定細(xì)胞系。從克隆構(gòu)建、細(xì)胞系建立、基因擴(kuò)增、單克隆篩選、細(xì)胞系鑒定、到功能研究，全方位的實(shí)驗(yàn)選擇可滿足研究者對蛋白表達(dá)、基因沉默等多種科研需求。

選擇威斯騰生物哺乳動物穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù)，您可以：

1）自由選擇基因插入方式

2）自由選擇克隆載體

3）自由選擇靶細(xì)胞系

4）自由選擇擴(kuò)增基因或調(diào)整蛋白表達(dá)量

基因敲入技術(shù)一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯騰生物利用最新的CRISPR/Cas系統(tǒng)可以有效的實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞系特定基因的敲入。

我們利用該技術(shù)，定點(diǎn)敲入各種細(xì)胞系中的特定基因。對打靶細(xì)胞進(jìn)行藥物篩選，利用CRISPR/Cas系統(tǒng)獲得的基因敲入細(xì)胞的剔除效率會明顯高于常規(guī)的利用RNAi和shRNA介導(dǎo)的基因敲落。

技術(shù)特色

1、可實(shí)現(xiàn)多個(gè)靶基因位點(diǎn)及多個(gè)基因的同時(shí)敲入
2、最新Nickase酶/雙gRNA技術(shù)，顯著降低脫靶率

3、無種屬限制，適用于各種細(xì)胞系的靶向敲入

操作流程

靶向目標(biāo)序列sgRNA的設(shè)計(jì)及載體構(gòu)建

目標(biāo)細(xì)胞系共轉(zhuǎn)染

陽性細(xì)胞株的篩選和鑒定

參考細(xì)胞系

腫瘤細(xì)胞系： BEL-7402人肝癌細(xì)胞 CNE人鼻咽癌細(xì)胞 Hela人宮頸癌細(xì)胞 MCF-7人乳腺癌細(xì)胞等

神經(jīng)細(xì)胞系：SK-N-SH人神經(jīng)母瘤細(xì)胞

卵巢細(xì)胞系：SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞

血管平滑肌細(xì)胞系：VSMC血管平滑肌

成纖維細(xì)胞系：包皮成纖維細(xì)胞，心肌成纖維細(xì)胞

肺細(xì)胞系：SK-MES-1人肺鱗癌細(xì)胞 NCI-H460人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 A549人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

腎細(xì)胞系：NRK腎小球足細(xì)胞

巨噬細(xì)胞：MH-S小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 THP-1人單核巨噬細(xì)胞

內(nèi)皮細(xì)胞：HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

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具體CRISPR /Cas9細(xì)胞建系技術(shù)定制服務(wù)，歡迎聯(lián)系我們。

威斯騰實(shí)驗(yàn)服務(wù)流程

威斯騰生物服務(wù)項(xiàng)目

【本平臺合作項(xiàng)目】
分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測、影像學(xué)檢測、原代培養(yǎng)、細(xì)胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量高內(nèi)涵篩選、藥效學(xué)評價(jià)、藥理毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、慢病毒包裝與穩(wěn)轉(zhuǎn)株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析、知識產(chǎn)權(quán)服務(wù)！
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