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威斯騰公眾號

分子生物學檢測
分子克隆和質粒載體構建

時間:2020-07-21 13:32:00 瀏覽:2998次


一、分子克隆的相關載體

DNA片段的克隆需要合適的載體,載體或是質粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經過人工改造。作為載體必須具備兩條件:一是該載體在細胞內必須能自主復制,即必須具備復制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復制原點區域內。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆,載體上常有篩選標記,如對抗菌素的抗性,某些基因產物的顯色反應等。
二、服務要求

1、請以Email等形式告知我們服務的主要目的及具體要求。

2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括:PCR擴增產物;RTPCR擴增產物;從其它質粒上酶切得到的DNA片段等。

3、提供DNA片段的電泳照片,并請標明Marker有濃度。

4、提供載體來源與背景資料。

5、注明克隆使用的酶切位點以及是否需要平端連接等。

三、相關材料說明

1、對于實驗材料中涉及病原體等危險材料不接受。

2、實驗中涉及的堿基序列請以EMAIL的形式發到我中心。

3、實驗中的使用載體要盡量提供背景資料:(質粒大小,抗性,拷貝數,多克隆位點等)如果是商品化載體,請您提供生產廠家及標準名稱;如果所提供載體是您自己構建的請注明大體結構情況。

4、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素,氯霉素,卡那霉素)以外的抗生素需您提供。

5、您自己提供的引物如果為干品,請您標注具體的OD數,如果是液體態,請您標明濃度。

6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。(最好同時提供相應的質粒);如果提供質粒,則質粒的量最好在4ug以上;如果提供的是PCR產物,則PCR產物量最好在5u以上(最好附上電泳圖)

7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時應首先在液氮中速凍,保存在-80度的冰箱中,使用干冰運輸。

四、結果提供

1、相關的實驗說明和相關的酶切圖片。

2、測序的結果。

3、構建好的載體和菌液各一份。

4、如有鑒定的客戶提供PCR鑒定圖片。

五、實驗完成時間:

30個工作日


六、威斯騰服務流程:



七、威斯騰生物服務項目

分子生物學檢測 蛋白質與免疫學 動物實驗
實時熒光定量PCR 單克隆抗體制備 帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP) 多克隆抗體制備 抑郁癥動物模型
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 Western-blot 實驗服務 脊髓損傷模型
生化指標檢測 蛋白雙向電泳實驗服務 腦外損傷模型
雙熒光素酶報告基因檢測 原核蛋白表達純化 骨神經損傷模型
染色質免疫共沉淀(ChIP) 真核蛋白表達純化 心肌缺血模型
GST pull Down ITRAQ定量蛋白質組學 心力衰竭模型
SLAC蛋白組學 肺動脈高血壓動物模型
高血壓模型
病毒包裝純化 實驗課題整體外包 粥樣動脈硬化模型
過表達/干擾慢病毒包裝純化 整體課題外包 大腦中動脈阻塞模型
過表達/干擾腺病毒包裝純化 細胞整體實驗外包 慢性之氣管炎模型
逆轉錄病毒包裝純化 動物整體實驗外包 過敏性哮喘模型
腺相關病毒包裝純化 肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片 原代細胞培養 肝纖維化模型
細胞因子芯片 骨髓間充質干細胞培養 膽結石模型
生長因子芯片 脂肪干細胞培養 急性胰腺炎模型
信號通路磷酸化水平檢測芯片 心肌成纖維細胞培養 急性腎衰竭模型
BioPlex懸浮芯片 軟骨細胞培養 體內血栓模型
生長因子芯片 血管內皮細胞培養 關節炎模型
炎癥因子芯片 神經元細胞培養 I型和II型糖尿病模型
血管生成因子芯片 內皮組細胞原代培養 裸鼠成瘤
凋亡因子芯片 基因編輯動物
趨化因子芯片 電生理相關服務 動物整體實驗服務
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 膜片鉗實驗
細胞生物學 高通量測序 代謝組學
細胞原代培養 mRNA測序 氣相色譜GC/MS
MTT檢測 LncRNA測序 液相色譜LC/MS
細胞凋亡檢測 全基因組測序 核磁共震NMR
細胞周期檢測 RNA-Seq測序
細胞克隆形成實驗 外顯子測序 影像學相關實驗
Transwell細胞遷移/侵襲 16s擴增子測序 Micro-CT
流式分選 Small RNA測序 小動物活體成像
CCK8/XTT檢測 宏基因組測序 核磁共振
臺盼藍檢測細胞活性 單細胞測序 PET-CT
藥物篩選細胞學實驗 circleRNA測序
細胞粘附性檢測 甲基化測序 基因編輯動物
細胞劃痕實驗 條件性敲除小鼠/大鼠
細胞生物學整體實驗 全基因敲除小鼠/大鼠
細胞成管實驗
病理學檢測 CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 基因芯片
掃描電鏡 基因定點突變細胞系 LncRNA芯片
透射電鏡 單基因敲除細胞系 miRNA芯片
HE染色 多基因敲除細胞系 mRNA芯片
免疫組化 目的基因敲入細胞系 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本)
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 報告基因敲入細胞系 SNP芯片(限人和小鼠來源樣本)
激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除細胞系
免疫熒光
Masson染色 CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
原位雜交 基因敲除大鼠/小鼠
熒光原位雜交 基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等)
行為學檢測 藥物篩選服務項目 藥效學評價
水迷宮實驗 高通量自動藥物篩選平臺 神經系統藥物藥效學評價
曠場實驗 細胞高內涵藥物篩選平臺 抗腫瘤藥物藥效學評價
重復性刻板行為檢測 蛋白質組學靶標研發平臺 心血管系統藥物藥效學評價
動物跑臺檢測 分子藥理研究平臺 泌尿系統藥物藥效學評價
強迫游泳 生物膜片鉗藥物篩選平臺 內分泌系統藥物藥效學評價
常規藥物體外篩選 抗炎免疫藥物藥效學評價

【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
【全國免費熱線】400-675-6758
【電話】 023-65316016,023-65316556
【郵箱】 china-western@163.com
【官網網址】www.hbasx.com
【地址】 重慶市高新區二郎創業大道高科創業園D棟2樓   

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