質譜分析

中國生命科學實驗技術服務聯盟引進美國安捷倫公司的液相色譜質譜聯用儀。形成了高通量、高靈敏度和高分辨率的規模化蛋白質分析支撐技術體系，為促進蛋白質組學及相關研究的發展，共享先進的技術資源，近年來生物質譜實驗室蛋白質/多肽質譜鑒定、生物工程藥物結構確證和蛋白質組學多項成熟的分析技術已為國內外客戶提供了廣泛的服務。

設備儀器：

美國安捷倫公司Agilent （xct-6330） 型號的液相色譜儀，MS為美國熱電公司的TSQ型號質譜儀；質譜儀采用ESI（電噴霧電離）離子源，MS/MS 串連四極桿分析器。可在線檢測極性有機化合物、核酸、多肽、小分子蛋白質及其化學修飾產品的實際分子量，并對送檢樣品進行分子量鑒定，純度及修飾效果分析。

質量范圍M/Z 10～2,000 分辨率R=2M

測試范圍：
多肽、蛋白質的電噴霧質譜分子量測定以及天然產物分子、生物大分子、有機分子的質譜測試和研究

送檢樣品要求：樣品應盡量不含鹽份、離子表面活性劑、去垢劑及一些難揮發性鹽。樣品送檢量、溶解方式以及未知可否做質譜檢測的樣品可與我們的工作人員聯系以便提高檢測效率。

（送樣單請附帶檢測樣品的品名及精確計算分子量）

送樣須知：

A：樣品量：50pmol干粉或1ug/uL以上（一般測試）、100pmol干粉或1ug/uL以上（MALDI串聯質譜分析）、100ug干粉以上（二硫鍵分析、糖基化分析，***酸化分析，其他修飾分析）、10ug干粉以上（SDS-PAGE或IEF）；

B：鹽含量：揮發性無機鹽，<20mM，請勿使用PBS、SDS和尿素等質譜干擾物質；

C：考馬斯亮藍染色樣品可全部接收，銀染過程中不得使用戊二醛作為固定劑；

D：請告知樣品是否有修飾，并請注明修飾方式。

主要應用 :

* 蛋白質組學研究 * 寡聚糖和糖蛋白的研究 * 小分子化合物分析

* 藥物發現和研發 * 食品和環境樣品分析

檢測報告：

從收到樣品起1-2個工作日內可給出樣品的檢測報告，以電子郵件的形式發給您并附帶檢測結果分析。包括結果有：一級質譜：質譜圖、肽段分子量、數據庫檢索結果； 二級質譜：質譜圖、肽段分子量、數據庫檢索結果、肽段氨基酸序列、修飾位點等。

脂質組學分析

對脂類的準確鑒定和絕對定量在脂質代謝的綜合研究中起著重要的作用。基于穩定同位素標記內標（SIL-IS）及響應因子（RF）建立的脂質組全定量庫，可對Plasmenyl-glycerophosphatidylcholine（pPC）、Lysoglycerophosphatidylcholine（LPC）和Sphinganine（Sph）等多達34類脂質進行準確定性以及絕對定量。相較于傳統的脂質組學檢測方法需要添加 多種SIL-IS的弊端，我們通過引入RF使得我們的脂質組全定量方法，在保持與傳統方法相當定量精度以及日間重復性的基礎上，可定性定量物質種類更多、通量更高。通過對我們包含76361種脂質、181300張MS/MS二級質譜圖的自建脂質二級質譜庫的檢索匹配，我們可以僅用單個SIL-IS，對生物樣本種數萬種脂質同時進行準確定性以及絕對定量，且上述工作均基于計算機程序自動化運作，高效便捷。

技術優勢

脂質檢測效率高：可實現單一SIL-IS同時高通量定性，絕對定量上萬種脂質；

專業團隊檢測分析：通過計算機程序自動化運行。

樣本要求

植物組織 200-500 mg

動物及臨床組織標本 200 mg

血清、血漿 200 μL

微生物、細胞 1×107 cells

生物學重復

樣本數量：植物和微生物n≥6，動物樣本n≥10，臨床樣本n≥30，所有重復樣本獨立分析。

檢測平臺

UHPLC-QTOF-MS（Agilent 1290 UHPLC-AB 6600/5600 MS）

UHPLC-QE-MS（Agilent 1290 UHPLC-Thermo Q Exactive Focus/Plus/HF）

檢測范圍

pPC、LPC、Sph、Cer、SM、Cer-p、PhytoSph和HexCer等34類脂質

應用方向

1、通過分析各種代謝性疾病的不同代謝途徑的脂質成分變化，揭示出相關疾病發生、發展過程中脂質成分的功能和影響；

2、通過比較不同處理，生物樣本中脂質成分的差異，探究脂質成分的生物學功能。

威斯騰實驗服務流程

威斯騰生物服務項目

分子生物學檢測	蛋白質與免疫學	動物實驗
實時熒光定量PCR	單克隆抗體制備	帕金森疾病模型
免疫共沉淀（Co-IP）	多克隆抗體制備	抑郁癥動物模型
ELISA（酶聯免疫吸附法）技術	Western-blot 實驗服務	脊髓損傷模型
生化指標檢測	蛋白雙向電泳實驗服務	腦外損傷模型
雙熒光素酶報告基因檢測	原核蛋白表達純化	骨神經損傷模型
染色質免疫共沉淀（ChIP）	真核蛋白表達純化	心肌缺血模型
GST pull Down	ITRAQ定量蛋白質組學	心力衰竭模型
	SLAC蛋白組學	肺動脈高血壓動物模型
		高血壓模型
病毒包裝	實驗課題整體外包	粥樣動脈硬化模型
過表達/干擾慢病毒包裝純化	整體課題外包	大腦中動脈阻塞模型
過表達/干擾腺病毒包裝純化	細胞整體實驗外包	慢性之氣管炎模型
逆轉錄病毒包裝純化	動物整體實驗外包	過敏性哮喘模型
腺相關病毒包裝純化		肺炎大鼠模型
		肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片	原代細胞培養	肝纖維化模型
細胞因子芯片	骨髓間充質干細胞培養	膽結石模型
BioPlex懸浮芯片	脂肪干細胞培養	急性胰腺炎模型
生長因子芯片	心肌成纖維細胞培養	急性腎衰竭模型
炎癥因子芯片	軟骨細胞培養	體內血栓模型
血管生成因子芯片	血管內皮細胞培養	關節炎模型
凋亡因子芯片	神經元細胞培養	I型和II型糖尿病模型
趨化因子芯片	內皮組細胞原代培養	裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片		基因編輯動物
	電生理相關服務	動物整體實驗服務
	膜片鉗實驗
細胞生物學檢測	高通量測序	代謝組學
細胞原代培養	mRNA測序	氣相色譜GC/MS
MTT檢測	LncRNA測序	液相色譜LC/MS
細胞凋亡檢測	全基因組測序	核磁共震NMR
細胞周期檢測	RNA-Seq測序
細胞克隆形成實驗	外顯子測序	影像學相關實驗
Transwell細胞遷移/侵襲	16s擴增子測序	Micro-CT
流式分選	Small RNA測序	小動物活體成像
CCK8/XTT檢測	宏基因組測序	核磁共振
臺盼藍檢測細胞活性	單細胞測序	PET-CT
藥物篩選細胞學實驗	circleRNA測序
細胞粘附性檢測	甲基化測序	基因編輯動物
細胞劃痕實驗		條件性敲除小鼠/大鼠
細胞生物學整體實驗		全基因敲除小鼠/大鼠
細胞成管實驗
病理檢測	CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入	基因芯片
掃描電鏡	基因定點突變細胞系	LncRNA芯片
透射電鏡	單基因敲除細胞系	miRNA芯片
HE染色	多基因敲除細胞系	mRNA芯片
免疫組化	目的基因敲入細胞系	甲基化芯片（限人和小鼠來源樣本）
Tunel（原位末端凋亡法）檢測	報告基因敲入細胞系	SNP芯片（限人和小鼠來源樣本）
激光共聚焦	miRNA/LncRNA敲除細胞系
免疫熒光
Masson染色	CRISPR/Cas9動物敲除/敲入
原位雜交	基因敲除大鼠/小鼠
熒光原位雜交	基因敲入大鼠/小鼠
特殊染色（PSA、茜素紅、阿爾新藍等）
行為學檢測	藥物篩選服務項目	藥效學評價
曠場實驗	高通量自動藥物篩選平臺	抗腫瘤藥物藥效學評價
重復性刻板行為檢測	細胞高內涵藥物篩選平臺	心血管系統藥物藥效學評價
動物跑臺檢測	蛋白質組學靶標研發平臺	泌尿系統藥物藥效學評價
強迫游泳	分子藥理研究平臺	內分泌系統藥物藥效學評價
	生物膜片鉗藥物篩選平臺	抗炎免疫藥物藥效學評價
	常規藥物體外篩選

【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！
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